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公共用纺织品安全技术规范
更新时间:2011-08-11 10:20
  •  前 言
        本标准第4章为强制性条款。为消除公共场所使用纺织品存在的卫生、质量的隐患,保障消费者的健康、卫生,规范公共场所使用纺织品的市场需求,制定本标准。
        本标准按GB / T1.1 —2000 《标准化工作导则第 1 部分:标准的结构和编写规则》 编制。
        本标准附录 A 、附录 B 、附录 C 、附录 D 为规范性附录,附录 E 为资料性附录。
        本标准由江苏省纤维检验所(江苏省纺织产品质量监督检验测试中心)提出。本标准由江苏省纤维检验所(江苏省纺织产品质量监督检验测试中心)、南京金龙纺实业有限公司、江苏康乃馨织造有限公司、南通斯得福纺织装饰有限公司起草。
        本标准主要起草人:李辉、石庆、魏长生、周观林。


     
    公共用纺织品安全技术规范
     

    1 范围
       本规范规定了公共用纺织品安全技术规范的术语和定义、要求、试验方法。
       本规范适用于江苏省境内公共场所用纺织品的要求。
    2 规范性引用文件
       下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 
        GB 251—1995 评定沾色用灰色样卡 
        GB/T5455—1997 纺织品燃烧性能试验垂直法 
        GB/T7573—2002 纺织品水萃取液 PH 值的测定 
        GB/T817—1987 数值修约规则
        GB18383 — 2007 絮用纤维制品通用技术要求
        GB 18401 — 2003 国家纺织产品基本安全技术规范
        FZ / T62006 —2004 毛巾
    3 术语和定义
       下列术语和定义适用于本标准。
    3 . 1 公共用纺织品 linen supply 
       在公共场所,供不同的人,反复多次使用的纺织品,如:床上用品、毛巾类产品、服装、餐厅用纺织品、窗帘等。
     3 . 2 医疗用公共用纺织品 hospital textiles
       医疗机构内使用的公共用纺织品,如:病房及疹疗用纺织品、毛巾类产品、病员服等。
    3 . 3 非医疗用公共用纺织品hotel textiles
       不在医疗机构内使用的公共用纺织品。
    3 . 4 人体掉落物 body secretion
       从人身体上分泌、排泄、脱落的物质。
    4 要求
    4 . 1 分类
       公共用纺织品按使用类型分为为医疗用和非医疗用 2 类。
    4 . 2 
       安全指标公共用纺织品安全指标见表 1 。

     

    4 . 3 公共用纺织品中毛巾类产品、床单、被套、枕套、服装不应经过抗菌、阻燃处理。
    4 . 4 非医疗用公共用纺织品不应用医疗机构内部的洗涤设备进行洗涤;医疗用公共用纺织品不应
    宾馆、饭店等单位内部的洗涤设备进行洗涤;对外开展洗涤服务的公司,开展洗涤业务时,应分别处理医疗用公共用纺织品和非医疗用公共用纺织品(包括设备、环境、人员)。
    4 . 5 公共用纺织品中填充物应符合 GB18383 的规定。
    5 试验方法
    5 . 1 细菌、真菌
    5 . 1 . 1 取样
       以无菌操作用灭菌生理盐水或 PBS 湿润 3 个无菌医用棉拭子,并分别在3个 25cm² (5cm×5cm)取样处均匀涂抹三次,立即用灭菌剪刀剪去棉签手接触的部分,将3个棉拭子涂抹部分放入盛有30ml灭菌生理盐水或 PBS 的容器中密封,每个容器为一份样本,(1—5)℃ 保存, ( 4—6 ) h 内进行检验。将放有棉拭子的容器充分振摇,此液为 1 : 10 稀释液。
     5 . 1 . 2 菌落总数
       按附录 A 规定进行。
     5 . 1 . 3 大肠菌群
       按附录 B 规定进行。
    5 .1 . 4 致病菌
       按附录 C 规定进行。
     5 .1 . 5 真菌总数
       按附录 A 规定进行。
    5 . 2 萃取液pH值
    5 . 2 . 1 取样
       样品用0 . l mol / l 氯化钾溶液(用蒸馏水或去离子水配制)室温浸泡,浴比 1 : 50 ,浸泡时间为 1h 士 5min ,每10min 翻动一次,浸泡结束,取3份液样进行检测。
    5 .2 .2 检验方法
       按GB / T7573 规定进行。
    5 . 3 异味
       按GB18401 —2003 中 6 . 7 规定进行,异味种类增加氯、汗、血腥等气味。
    5 . 4 色污渍
       按GB251 规定进行。
    5 . 5 人体掉落物
       按附录 D 规定进行。
    5 . 6 吸水性
       按FZ / T62006—2004 中附录 A 规定进行。
    5 . 7 阻燃性
       按GB / T5455 规定进行。
           
       警告 ― 使用本标准微生物检验的人员应有微生物知识和正规实验室工作的实践经验。本标准并未指出所有可能的安全问题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施,并保证符合国家有关法规规定的条件。


        附录 A
       (规范性附录)
         菌落总数检验方法

    A . 1 细菌菌落总数检验方法
    A . 1 . 1 以无菌(100 级)操作,吸取 1 : 10 稀释液 2.0ml 检样,分别注入到两个灭菌平皿内,每皿 1 . 0 ml 。当估计含菌量过高时(每平皿生长菌落数超过 300 个),可将采样液作十倍递增稀释后再接种,即吸取1.0ml 加到9.0ml 灭菌生理盐水中,混匀,此液为 1 : 100 稀释液,每个稀释度也做两个平皿。
    A . 1 . 2 将已融化冷却至 45 ℃ 左右的营养琼脂培养基倾入平皿,每皿约(15一20 ) ml ,并轻轻旋摇平皿,使样液混匀,待培养基凝固后,翻转平皿使底向上,置于(36士1)℃ 培养箱培养 48h 。
    A . 2 菌落数计算
       作平皿菌落计数时,可用肉眼直接观察,必要时用放大镜检查以防遗漏,在记下各平皿的菌落数后,求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。若平皿中有连成片状的菌落,该平皿不计数;若片状菌不到平皿中的一半,而其余一半中菌落分布均匀,则可将此半个平皿菌落计数后乘以 2 ,所得结果代表全皿菌落数。
       菌落总数按公式(A .1)计算:
       M=k×n……………………………………………………………………………… ( A . l ) 
       式中:m—— 细菌菌落总数, cfu / 25cm²;
              k —— 稀释倍数;
              n —— 平均菌落数。
    A . 3 菌落计数报告
    A . 3 . 1 选择平均菌落数在30—300之间的稀释度,乘以稀释倍数计数(见表A.1中例1)。
    A .3 . 2 若有两个稀释度的平均菌落数均在 30—300 之间,则由两菌落总数之比值来决定,若其比值小于或等于2 ,应报告平均数,若大于2 ,则报告其中稀释度较低的平皿菌落数(见表A .1中例2 、例3)。
    A . 3 . 3 若所有稀释度的平均菌落数均大于300 , 则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告(见表A .1中例4)。
    A . 3 . 4 若所有稀释度的平均菌落数均小于30 ,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告(见表A , 1中例5)。
    A . 3 . 5 若所有稀释度平均菌落数均不在 30 —300 之间,其中一个稀释度平均菌落数大于 300 ,而相邻的另一个稀释度平均菌落数小于 30 ,则以接近 30 或300 的平均菌落数乘以稀释倍数报告(见表A .l中例 6)。
    A . 3 . 6 若所有的稀释度都无菌生长,报告数为小于1 cfu / 25cm²(见表A.1中例7 )。
    A . 3 . 7 菌落计数报告,菌落数在 100 以内时,按实际数值报告,大于等于 100 时,采用二位有效数字,按GB / TS 170《 数值修约规则》标准进行舍取,可用科学计数法进行表示(见表A .1中报告方式栏)。在报告菌落数为“不可计”时,应注明样品的稀释度。
    A . 4 真菌菌落总数检测方法
       真菌的检测程序与细菌检测操作程序基本相同,主要区别在于所用培养基、间不同。真菌培养用沙堡氏琼脂培养基,培养温度(25士l )℃ ,培养时间为5d 。要随意打开培养皿的盖,以防止真菌袍子四处飞扬污染实验环境。培养温度、培养时计数菌落数时,不要随意打开培养皿的盖,以防止真菌孢子四处飞扬污染实验环境。



    附录B
     (规范性附录)
      大肠菌群检验方法

    B . 1 操作步骤
       以无菌(100 级)操作,取1:10 稀释液 5ml 接种于50ml乳糖胆盐发酵管,置(36士1 ) ℃培养24h , 如不产酸也不产气,则报告为大肠菌群阴性。
       如产酸产气,则划线接种伊红美蓝琼脂平板,置(36士l)℃ 培养(18—24 ) h ,观察平板上菌落形态。典型的大肠菌落为黑紫色或红紫色,圆形,边缘整齐,表面光滑湿润,常具有金属光泽,也有的呈紫黑色,不带或略带金属光泽,或粉红色,中心较深的菌落。
    取疑似菌落 1—2 个作革兰氏染色镜检,同时接种乳糖发酵管,置(36士l)℃ 培养 24h ,观察产气情况。
    B . 2 结果报告
       凡乳糖胆盐发酵管产酸产气,,乳糖发酵管产酸产气,在伊红美蓝平板上有典型大肠菌落,革兰氏染色为阴性无芽胞杆菌,可报告被检样品检出大肠菌群。


         附录 C
         (规范性附录)
          致病菌检验方法

    C . 1 绿脓杆菌检测方法
    C . 1 . 1 操作步骤
       以无菌(100 级)操作,取1 : 10 稀释液 5ml ,加入到 50ml SCDLP 培养液中,充分混匀,置(36士1 ) ℃ 培养(18—24 ) h 。如有绿脓杆菌生长,培养液表面呈现一层薄菌膜。培养液常呈黄绿色或蓝绿色。从培养液的薄菌膜处挑取培养物,划线接种十六烷三甲基溴化铵琼脂平板,置(36士l)℃ 培养(18—24 ) h ,观察菌落特征。铜绿假单胞菌在此培养基上生长良好,菌落扁平,边缘不整,光滑湿润,呈灰白色,菌落周围培养基常扩散有水溶性色素。此培养基选择性强,大肠杆菌不能生长,革兰氏阳性菌生长较差。在缺乏十六烷三甲基溴化铵琼脂时也可用乙酰胺培养基进行分离,从培养液的薄菌膜处挑取培养物,划线接种于乙酰胺琼脂平板,置(36士l)℃ 培养(18—24 ) h ,观察菌落特征。铜绿假单胞菌在此培养基上生长良好,菌落扁平,边缘不整,菌落周围培养基略带粉红色,其他菌不生长。
        取可疑菌落涂片作革兰氏染色,镜检为革兰氏阴性菌者应进行下列试验:
        氧化酶试验:取一小块洁净的白色滤纸片放在灭菌平皿内,用无菌玻璃棒挑取可疑菌落涂在滤纸片上,然后在其上滴加一滴新配制的l%二甲基对苯二胺试液,(15—30 ) s 内出现粉红色或紫红色,为氧化酶试验阳性,不变色者为阴性。
        绿脓菌素试验:取2—3个可疑菌落,分别接种在绿脓菌素测定用培养基( PDP )斜面, ( 36 士 l ) ℃ 培养( 20 — 24 ) h ,加入氯仿(三氯甲烷)(3—5 ) ml ,充分振荡使培养物中可能存在的绿脓菌素溶解于氯仿液内,待氯仿(三氯甲烷)提取液呈蓝色时,用吸管将氯仿移到另一试管中并加入 1mol / l 的盐酸 1ml ,振荡后静置片刻。如上层出现粉红色或紫红色即为阳性,表示被检物中有绿脓菌素存在。
        硝酸盐还原产气试验:挑取被检菌落纯培养物接种在硝酸盐胨水培养基中,置(36士l)℃ 培养24h ,硝酸盐胨水培养基的小倒管中有气体者即为阳性。表明该菌能还原硝酸盐,并将亚硝酸盐分解产生氮气。
        明胶液化试验:取可疑菌落纯培养物,穿刺接种在明胶培养基内,置(36士1)℃ 培养 24h,取出放于(4—10 )℃ 冰箱30min ,如仍呈溶解状液态为阳性,凝固不溶者为阴性。 
        42 ℃ 生长试验:取可疑培养物,接种在普通琼脂斜面培养基上,置(41—42 )℃ 培养箱中培养(24一48 ) h ,有绿脓杆菌生长为阳性。
    C . 1 . 2 结果报告
       被检样品经增菌分离培养后,证实为革兰氏阴性杆菌,氧化酶及绿脓杆菌试验为阳性者,即可报告为被检样品中检出绿脓杆菌。当绿脓菌素试验为阴性时,但液化明胶试验、硝酸盐还原产气试验和42 ℃生长试验三者皆为阳性时,仍可报告被检样品中检出绿脓杆菌。
    C . 2 金黄色葡萄球菌检测方法
    C . 2 . 1 操作步骤
        以无菌(100 级)操作,取 l : 10 稀释液 5ml ,加入到 50mLSCDLP 培养液中,充分混匀,置(36士l ) ℃培养24h 。
        自上述增菌液中取1—2 接种环,划线接种在 Baird Parker 氏培养基,如无此培养基,也可划线接种在血琼脂培养基上,置(36士1)℃ 培养(24一48 ) h 。在血琼脂平板上该菌落呈金黄色,大而突起,圆形,不透明,表面光滑,周围有溶血圈。在Baird Parker 氏培养基上为圆形,光滑,湿润,菌落直径为(2—3 )mm ,颜色呈灰色至黑色,边缘为淡色,周围为一混浊带,在其外层有一透明带。
        染色镜检:挑取典型菌落,涂片作革兰氏染色镜检,金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌,排列成葡萄状,无芽孢与夹膜,直径为(0 . 5—1 . 0)µm。镜检符合上述情况,应进行下列试验:
        甘露醇发酵试验:取上述菌落接种甘露醇培养液,置(36士l)℃ 培养 24h ,发酵甘露醇产酸者为阳性。
        血浆凝固酶试验:
        波片法:取清洁干燥载玻片,一端滴加一滴生理盐水,另一端滴加一滴兔血浆,挑取菌落分别与生理盐水和血浆充分研磨混合,血浆与菌苔混悬液在5min 内出现团块或颗粒状凝块时,而盐水滴仍呈均匀混浊无凝固现象为阳性,如两者均无凝固现象为阴性。凡玻片试验呈阴性反应或盐水滴与血浆均有凝固现象,再进行试管凝固酶试验。
       试管法:吸取1:4 新鲜血浆0 .5ml ,放入灭菌小试管中,再加入待检菌24h 肉汤培养物0 .5ml 。混匀,放(36士1)℃ 培养箱或水浴中,每30min观察一次,24h之内呈现凝块即为阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物各0 .5ml 作为阳性与阴性对照。
    C . 2 . 2 结果报告
       凡在琼脂平板上有可疑菌落生长,镜检为革兰氏阳性葡萄球菌,并能发酵甘露醇产酸,血浆凝固酶试验为阳性者,可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。
    C . 3 溶血性链球菌检测方法
    C . 3 . 1 操作步骤
        以无菌( 100 级)操作,取 1 : 10 稀释液 5ml 加入到50ml葡萄糖肉汤中,置于(36 士 l )℃ 培养 24h 。
    将培养物划线接种于血琼脂平板,( 36士1)℃培养24h 观察菌落特征。溶血性链球菌在血平板上为灰白色,半透明或不透明,针尖状突起,表面光滑,边缘整齐,周围有无色透明溶血圈。
        染色镜检:挑取典型菌落作涂片革兰氏染色镜检,应为革兰氏阳性,呈链状排列的球菌。镜检符合上述情况,应进行下列试验:
        链激酶试验:吸取草酸钾血浆 0.2ml ( 0 . 01g 草酸钾加5ml兔血浆混匀,经离心沉淀,吸取上清液),加入0.8ml 灭菌生理盐水,混匀后再加入待检菌 24h 肉汤培养物0 .5ml和0.25%氯化钙0 .25ml , 混匀,放(36士l)℃ 水浴中,2min 观察一次(一般 10min 内可凝固),待血浆凝固后继续观察并记录熔化时间。如 2h 内不熔化,继续放置 24h 观察,如凝块全部熔化为阳性,24h仍不熔化为阴性。
       杆菌肽敏感试验:将被检菌落液涂于血平板上,用灭菌镊子取每片含0.04单位杆菌肽的纸片放在平板表面上,同时以己知阳性菌株作对照,在(36士2)℃ 下放置(18—24 ) h ,有抑菌带者为阳性。
    C . 3 . 1 结果报告
       镜检革兰氏阳性链状排列球菌,血平板上呈现溶血圈,链激酶和杆菌肽试验阳性,可报告被检样品检出溶血性链球菌。


      附录 D
      (规范性附录)
      人体掉落物检验方法

    D . 1 原理
        以人眼感观检测样品上是否有毛发、皮屑、体液、污渍等。
    D. 2 试验条件
        检测人员应先洗脸、洗手,并将头发、手、臂等密封起来,以防自身污染影响检测结果。
    D. 3 样品
        毛巾类用品、服装等可以是摆放好待用的,也可以是摆放前成包的;床上用品应该是摆放好待用的。
    D. 4 方法
        现场以人眼感观检验为主,需要时可辅以(l—2)倍的放大镜、尖嘴镊子检测是否有毛发、皮屑、体液、污渍等,对最大尺寸小于1.0mm的物体不予以判断,检测到的物质应收集、密封保存。


        附录 E
         (资料性附录)
          培养基与试剂制备

    E.1 营养琼脂培养基
    成分:
    蛋白胨                        10.0g
    牛肉膏                        3.0g
    氯化钠                        5.0g
    琼脂                          15g—20g
    蒸馏水                        I000ml 
        制法:除琼脂外其他成分溶解于蒸馏水中,调pH至7.2—7.4,加入琼脂,加热溶解,分装试管,121 ℃ 高压灭菌 20min 后备用。
    E.2 乳糖胆盐发酵管
    成分:
    蛋白胨                                     20.0g
    猪胆盐(或牛、羊胆盐)                     5.0g
    乳糖                                        10.0g
    0.04%溴甲酚紫水溶液                        25ml
    蒸馏水                                    加至1000ml 
        制法:将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中,校正pH至7.4,加入指示剂,分装每管 50ml ,并放入一个小倒管, 115℃ 高压灭菌15min后备用。
    E.3 乳糖发酵管
    成分:
    蛋白胨                                     20.0g
    乳糖                                       10.0g
     0 . 04 %溴甲酚紫水溶液                    25 ml
    蒸馏水                                     加至1000ml 
        制法:将蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH至7.4 ,加入指示剂,分装每管 10ml ,并放入一个小倒管, 115 ℃高压灭菌15min后备用。
    E.4伊红美蓝琼脂(EMB )
    成分:
    蛋白胨                                     20.0g
    乳糖                                       10.0g
    磷酸氢二钾                                 2.0g
    琼脂                                       15g 一 20g
    2 %伊红 Y溶液                             20ml
    0.65 %美蓝溶液                            10ml
    蒸馏水                                     加至 1000ml 
        制法:将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH至7.1,分装于烧瓶内,121 ℃ 高压灭菌 15min 备用,临用时并加热溶化琼脂加入乳糖(过滤灭菌),冷至 55 ℃ ,加入伊红和美蓝溶液摇匀,倾注平板。
    E.5SCDLP 液体培养基
    成分:
    酪蛋白胨                                   17 . 0g
    大豆蛋白胨                                 3 . 0g
    氯化钠                                     5 . 0g
    磷酸氢二钾                                 2 . 5g
    葡萄糖                                     2 . 5g
    卵磷脂                                     1 . 0g
    吐温 80                                    7 . 0g
    蒸馏水                                     1000ml
        制法:将各种成分混合(如无酪蛋白胨和大豆蛋白胨也可用日本多价胨代替),加热溶解,调pH 至7.2 — 7.3 ,分装, 121 ℃ 高压灭菌 20min ,摇匀,避免吐温80沉于底部,冷至 25 ℃ 后使用。
    E.6十六烷三甲基溴化铵培养液
    成分:
    牛肉膏                                      3 . 0g
    蛋白胨                                      10.0g
    氯化钠                                      5 . 0g
    十六烷三甲溴铵 0.3g琼脂                 15g —20g
    蒸馏水                                      1000ml 
        制法:除琼脂外,上述各成分混合加热溶解,调pH 至 7.4 一 7.6 ,然后加入琼脂, 115℃ 高压灭菌 20min ,冷至 55 ℃ 左右,倾注平皿。
    E.7 乙酰胺培养基
    成分:
    乙酰胺                                      10.0g
    氯化钠                                      5.0g
    无水磷酸氢二钾                              1.39g
    无水磷酸二氢钾                              0.73g
    硫酸镁( MgSO 4• 7H2O )                     0.5g
    酚红                                        0.012g
    琼脂                                        15g一 20g
    蒸馏水                                       1000ml 
        制法:除琼脂和酚红外,将其他成分加到蒸馏水中,加热溶解,调pH 至 7.2—7.4,然后加入琼脂和酚红,121 ℃ 高压灭菌 20min 后,制成平板备用。
    E.8 绿脓菌素测定用培养基斜面
    成分:
    蛋白胨                                      20.0g
    氯化镁                                      1 . 4g
    硫酸钾                                      10 . 0g
    琼脂                                       15g—20g
    甘油(化学纯)                              10.0g
    蒸馏水                                     加至1000ml 
        制法:将蛋白胨、氯化镁和硫酸钾加到蒸馏水中,加热溶解,调pH 至7.4,加入琼脂和甘油,加热溶解,分装试管,l15 ℃高压灭菌20min ,制成斜面备用。
    E.9 明胶培养基
    成分:
    牛肉膏                                      3.0g
    蛋白胨                                      5.0g
    明胶                                         120g
    蒸馏水                                     1000ml 
       制法:各成分加入蒸馏水中浸泡20min ,加热搅拌溶解,调pH 至7.4, 5ml分装于试管中, 115 ℃高压灭菌20min ,直立制成高层备用。
    E.10 硝酸盐蛋白胨水培养基
    成分:
    蛋白胨                                     10.0g
    酵母浸膏                                   3.0g
    硝酸钾                                     12.0g
    亚硝酸钠                                   0.5g
    蒸馏水                                     1000ml
        制法:将蛋白胨与酵母浸膏加到蒸馏水中,加热溶解,调pH至7.2,煮沸过滤后补足液量,加入硝酸钾和亚硝酸钠溶解均匀,分装到加有小倒管的试管中,115 ℃高压灭菌20min 备用。
    E.11 Baird Parker 培养基
    成分:
    胰蛋白胨                                  10.0g
    牛肉膏                                    5.0g
    酵母浸膏                                  1.0g
    丙酮酸钠                                  10.0g
    甘氨酸                                   12.0g
    氯化锂( LiC1 • 6HzO )                    5.0g
    琼脂                                       20g
    蒸馏水                                     1000ml 
        增菌剂的配制: 30% 卵黄盐水50ml 与除菌过滤的1%亚碲酸钾溶液10ml 混合,保存于冰箱内备用。
        制法:将各成分加到蒸馏水中,加热煮沸完全溶解,冷至25 ℃调pH7.2。 分装每瓶95ml , 121 ℃ 高压灭菌20min 后备用。临用时加热溶化琼脂,每95ml加入预热至50 ℃ 的卵黄亚碲酸钾增菌剂 5ml ,摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的,使用前在冰箱储存不得超过18h。
    E.12 血琼脂培养基
    成分:
    营养琼脂                                 100ml
    脱纤维羊血(或兔血)                     10ml 
        制法:将灭菌后的营养琼脂加热溶化,凉至55 ℃ 左右,用无菌方法将10ml脱纤维血加入后摇匀,倾注平皿置冰箱备用。
    E.13 甘露醇发酵培养基
    成分:
    蛋白胨                                     10.0g
    牛肉膏                                     5.0g
    氯化钠                                     5.0g
    甘露醇                                     10.0g
    0.2%溴麝香草酚蓝溶液                       12ml
    蒸馏水                                     1000ml 
        制法:将蛋白胨、氯化钠、牛肉膏加到蒸馏水中,加热溶解,调pH至7.4,加入甘露醇和溴麝香草酚蓝混匀后,分装试管,115℃高压灭菌20min备用。
    E.14 葡萄糖肉汤
    成分:
    蛋白胨                                     10.0g
    牛肉膏                                     5.0g
    氯化钠                                     5.0g
    葡萄糖                                    10.0g
    蒸馏水                                    1000ml 
        制法:上述成分溶于蒸馏水中,调pH 至 7.2—7.4 ,加热溶解,分装试管,121℃高压灭菌15min后备用。
    E.15 兔血桨
        制法:取灭菌3.8%柠檬酸钠1份,兔全血4份,混匀静置,3000r / min 离心5min ,取上清,弃血球。
    E.16 沙堡氏琼脂培养基
    成分:
    蛋白胨                                   10.0g
    葡萄糖                                   40.0g
    琼脂                                     15g —20g
    蒸馏水                                   1000ml 
        制法:用700ml 蒸馏水将琼脂溶解,300ml蒸馏水将葡萄糖与蛋白胨溶解,混合上述两部分,摇匀后分装,l15℃高压灭菌15min备用。使用前,用过滤除菌方法加入 0.1g/l 的氯霉素或者 0.03g/l的链霉素。
        定性试验采用沙氏培养液,除不加琼脂外其他成分与制法同上。
    E.17 营养肉汤培养液
    成分:
    蛋白胨                                   10.0g
    氯化钠                                   5.0g
    牛肉膏                                   3.0g
    蒸馏水                                   1000ml 
        制法:调节pH 至7.2—7.4,分装, 115℃高压灭菌20min备用。
    E.18 澳甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基
    成分:
    蛋白胨                                  10.0g
    葡萄糖                                   5.0g
    蒸馏水                                  1000ml 
       制法:调节pH至7.0—7.2 ,加2%溴甲酚紫酒精溶液0.6ml , 115℃高压灭菌20min备用。
    E.19 革兰氏染色液
    结晶紫染色液:
    结晶紫                                  1.0g
    95%乙醇                                20ml
    1%草酸铵水溶液                        80ml 
       将结晶紫溶解于乙醇中,然后与草酸铵溶液混合。
    革兰氏碘液
    碘                                       1.0g
    碘化钾                                   2.0g
    蒸馏水                                   300ml
    脱色剂
    95 %乙醇
    复染液:
    (1) 沙黄复染液:
    沙黄                                      0.25g
    95%乙醇                                 10ml
    蒸馏水                                    90ml 
        将沙黄溶解于乙醇中,然后用蒸馏水稀释。
    (2) 稀石炭酸复红液:
        称取碱性复红10g ,研细,加95%乙醇100ml ,放置过夜,滤纸过滤。取该液10ml,加5%石炭酸水溶液90ml混合,即为石炭酸复红液。再取此液10ml ,加水90ml ,即为稀石炭酸复红液。
     E.20 0.03mol / L 磷酸盐缓冲液(PBS , pH7.2)
    成分:
    磷酸氢二钠                                2.83g
    磷酸二氢钾                                1.36g
    蒸馏水                                    1000ml

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